日本高清二区视频久二区-免费人成激情视频在线观看-日韩精品一区二区午夜成人版-国产成人精品亚洲日本专区61-国产精品18久久久久久欧美

優利科(上海)生命科學有限公司 · 品質創造價值 服務成就未來!
服務熱線:15021281375
DOWNLOAD

資料下載

當前位置:首頁資料下載尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)試劑盒說明書

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)試劑盒說明書

發布時間:2023/10/27點擊次數:500

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphosphprylaseUGP)試劑盒說明書

                                                       微量法100T/96S

 

   :正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

UDPG焦磷酸化酶是生物體糖原合成過程中的關鍵。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,將1-磷酸葡萄糖與UTP分子合成為UDP-葡萄糖(UDPG)。

 

測定原理:

UGP可逆催化反應生成1磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下將NADP轉化為NADPH340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。

 

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板

 

試劑組成和配制: 

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存。臨用前加2mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加2mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加2mL蒸餾水充分溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑五:液體2mL×1瓶,4℃保存。

 

酶液提取:

1.        組織:按照質量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。

2.        細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置冰上待測。

3.        液體:直接檢測。

 

測定操作:

1.        紫外分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2.        取微量石英比色皿/96孔板,依次加入100μL試劑一,20μL試劑二,20μL試劑三,20μL試劑四,20μL試劑五,20μL粗酶液,充分混勻,記錄340nm30s的吸光值A1330s的吸光值A2,△A=A2-A1

 

 

計算公式:

a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1)按照樣本蛋白濃度計算

酶活單位定義:每毫克組織蛋白每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /mg prot)=ΔA÷ε×d×V反總÷(V×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr

2)按照樣本質量計算

酶活單位定義:每組織每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /g 鮮重)=ΔA÷ε×d×V反總÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.54×ΔA÷W

3)按照細胞數量計算

酶活單位定義:每104個細胞每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /104 cell= ΔA÷ε×d×V反總÷(V×細胞數量÷V樣總) ÷T

=321.54×ΔA÷細胞數量

4)按照液體體積計算

酶活單位定義:每毫升液體每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /mL)=ΔA÷ε×d×V反總÷V÷T=321.54×ΔA

V反總:反應體系總體積,0.2mLεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g

 

b.使用96孔板測定的計算公式如下

1)按照樣本蛋白濃度計算

酶活單位定義:每毫克組織蛋白每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /mg prot)=ΔA÷ε×d×V反總÷(V×Cpr) ÷T=643.08×ΔA÷Cpr

2)按照樣本質量計算

酶活單位定義:每組織每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /g 鮮重)=ΔA÷ε×d×V反總÷(W ×V÷V樣總) ÷T=643.08×ΔA÷W

3)按照細胞數量計算

酶活單位定義:每104個細胞每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /104 cell= ΔA÷ε×d×V反總÷(V×細胞數量÷V樣總) ÷T

=643.08×ΔA÷細胞數量

4)按照液體體積計算

酶活單位定義:每毫升液體每分鐘消耗1 nmolNADP定義為一個酶活力單位。

UGPnmol/min /mL=ΔA÷ε×d×V反總÷V÷T=643.08×ΔA

V反總:反應體系總體積,0.2mLεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,0.5cmV樣:加入樣本體積,0.02mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g

文件下載    圖片下載    
聯系我們
掃碼加微信 移動端瀏覽
Copyright © 2025優利科(上海)生命科學有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2022019216號-1
技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml
主站蜘蛛池模板: 99久久综合狠狠综合久久| 久久精品成人免费观看三| 免费特级毛片| 午夜性色一区二区三区不卡视频| 一本一道精品欧美中文字幕| 亚洲a∨国产av综合av| 中日韩高清无专码区2021| 国产女人喷潮视频在线观看| 丰满日韩放荡少妇无码视频| 男人和女人做爽爽视频| 曰本大码熟中文字幕| 97国语精品自产拍在线观看| 国产精品高清一区二区三区| 亚洲精品久久久久久中文传媒| 亚洲精品毛片一区二区三区| 自拍偷在线精品自拍偷无码专区| 日本乱偷人妻中文字幕在线| 国产全肉乱妇杂乱视频| 亚洲成a人片在线观看无码3d| 男女裸交免费无遮挡全过程| 国产精品亚洲一区二区三区在线| 免费观看的av毛片的网站| 亚洲国产精品无码久久九九大片| 亚洲精品www久久久| 一本加勒比波多野结衣| 永久黄网站色视频免费无下载| 免费观看全黄做爰大片国产| 大陆极品少妇内射aaaaa| 巨胸爆乳美女露双奶头挤奶| 亚洲国产成人久久综合同性| 亚洲人成网站在线播放2020| 少妇愉情理伦片高潮日本| 男女啪啪做爰高潮免费网站| 中国少妇内射xxxx狠干| 欧美日本日韩| 少妇白浆高潮无码免费区| 成熟妇人a片免费看网站| 国模精品一区二区三区| 免费无码又爽又刺激软件下载直播| 国产强奷伦奷片| 98色精品视频在线|