日本高清二区视频久二区-免费人成激情视频在线观看-日韩精品一区二区午夜成人版-国产成人精品亚洲日本专区61-国产精品18久久久久久欧美

優利科(上海)生命科學有限公司 · 品質創造價值 服務成就未來!
服務熱線:15021281375
DOWNLOAD

資料下載

當前位置:首頁資料下載抗壞血酸氧化酶(ascorbate oxidase,AAO)活性測定試劑盒說明書

抗壞血酸氧化酶(ascorbate oxidase,AAO)活性測定試劑盒說明書

發布時間:2023/10/29點擊次數:521

抗壞血酸氧化酶ascorbate oxidaseAAO活性測定試劑盒說明書

                                                    微量法100T/96S

 

 

    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

AAO是定位于植物細胞壁的糖蛋白,屬藍銅氧化酶"家族。細胞壁內的抗壞血酸和AAO與細胞壁的代謝和生長有著密切的聯系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質膜上的細胞色素b還原,該過程中電子的跨膜運輸能夠促進細胞生長。

 

測定原理:

AAO可直接氧化AsA,通過測定AsA的氧化量,可計算得AAO活力。

 

實驗中所需儀器及設備:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調式移液器、研缽、冰、蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2mL蒸餾水充分溶解。

 

粗酶液提取:

按照組織質量(g:試劑一體(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g4離心10min,取上清置冰上待測。

 

AAO測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節波長到265 nm

2. 試劑二在25℃水浴鍋中預熱30 min

3. 依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、170μL預熱的試劑二和10μL試劑三,迅速混勻后在265nm測定10s130s光吸收A1A2A =A1-A2

 

AAO活性計算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

AAO活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol AsA 1個酶活單位

AAO(nmol/min /mg prot) = A÷(ε×d×V反總×109÷(Cpr×V)÷T

= 92.4×A÷Cpr

(2). 按樣本質量計算

AAO活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化1nmol AsA 1個酶活單位

 

AAO(nmol/min/g 鮮重) = A÷(ε×d×V反總×109÷(W×V÷V樣總)÷T

= 92.4×A÷W

εAsA265nm處摩爾吸光系數為5.42×104 L/mol/cmd:比色皿光徑(cm),1 cm V反總:反應體系總體積(L),200μL=2×10-4 L1061mol=1×106μmolCpr:上清液蛋白質濃度(mg/mL),需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒;W :樣品質量;V樣:加入反應體系中上清液體積(mL),20μL=0.02 mLV樣總:提取液體積,1 mL

T:催化反應時間(min),2min

 

b.使用96孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

AAO活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol AsA 1個酶活單位

AAO(nmol/min /mg prot) = A÷(ε×d×V反總×109÷(Cpr×V)÷T

=184.8×A÷Cpr

(2). 按樣本質量計算

AAO活性單位定義:25℃中每克樣本每分鐘氧化1nmol AsA 1個酶活單位

AAO(nmol/min/g 鮮重) = A÷(ε×d×V反總×109÷(W×V÷V樣總)÷T

= 184.8×A÷W

εAsA265nm處摩爾吸光系數為5.42×104 L/mol/cmd96孔板光徑(cm),0.5 cm V反總:反應體系總體積(L),200μL=2×10-4 L1061mol=1×106μmolCpr:上清液蛋白質濃度(mg/mL),需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒;W :樣品質量;V樣:加入反應體系中上清液體積(mL),20μL=0.02 mLV樣總:提取液體積,1 mL

T:催化反應時間(min),2min

 

注意事項:

配制好的試劑放在4℃保存,三天內使用完。

文件下載    圖片下載    
聯系我們
掃碼加微信 移動端瀏覽
Copyright © 2025優利科(上海)生命科學有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2022019216號-1
技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml
主站蜘蛛池模板: 少妇高潮喷水久久久久久久久久| 久久99国产精品尤物| 毛色毛片免费观看| 亚洲欧美日韩久久精品第一区| 爽爽影院免费观看视频| 国产精品va在线观看无码| 亚洲精品无人区| 婷婷婷国产在线视频| 久久久噜噜噜www成人网| 国产精品aⅴ视频在线播放| 99精品国产福利在线观看| 亚洲学生妹高清av| 亚洲乱码国产一区三区| 日本特黄特色aaa大片免费| 香蕉影院在线观看| 蜜桃一区二区三区| 大黑人交xxxx18视频| 婷婷成人丁香五月综合激情| 亚洲欧美洲成人一区二区三区| 天天爽天天爽天天爽| 亚洲人成无码网站| 中国浓毛少妇毛茸茸| 乱精品一区字幕二区| 国产精品美女一区二区三区 | 黑人粗大猛烈进出高潮视频| 精品久久久久久久久午夜福利| 国精无码欧精品亚洲一区| 国产亚洲精品一区二三区| 亚洲欧美中文日韩v在线97| 久久精品卫校国产小美女| 成人国内精品久久久久影院vr| 2022久久国产精品免费热麻豆| 欧美老熟妇牲交| 免费人妻av无码专区| 精人妻无码一区二区三区| 欧洲熟妇色xxxxx欧美老妇伦| 国产l精品国产亚洲区久久| 思思久久99热只有频精品66| 乱人伦人妻中文字幕无码| 国产精品美女www爽爽爽视频| 裸身美女无遮挡永久免费视频|